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提取植物DNA过程中,24:1即氯仿:异戊醇,求问异戊醇的作用。
提取植物DNA过程中,24:1即氯仿:异戊醇,求问异戊醇的作用。
提示:

提取植物DNA过程中,24:1即氯仿:异戊醇,求问异戊醇的作用。

异戊醇作用:减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。 异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。 异戊醇储存注意事项:储存于阴凉,通风的库房。远离火种,热源。库温不宜超过37℃。保持容器密封。应与氧化剂,酸类分开存放,切忌混储。采用防爆型照明,通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。 扩展资料 DNA提取的提取方法: 一,酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb 二,甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。 三,玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。 四,异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态) 五,表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。 六,加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。 七,碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。 参考资料来源:百度百科-DNA提取

植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一异成醇各起什么作用
提示:

植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一异成醇各起什么作用

植物DNA提取方法是采用CTAB法。
CTAB,是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7mol/L) 浓度下可溶,并稳定存在,但在低盐浓度(0.1~0.5mol/L NaCl)下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。经离心弃上清后,CTAB-核酸复合物再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB。

无水乙醇:沉淀DNA。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。

氯仿:克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。

异戊醇:减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。