氨苄青霉素抗性基因作用是
提示：
一个质粒携带有氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因
提示：
氨苄青霉素抗性基因作用是
氨苄青霉素抗性基因（Ampicillin resistance gene, ampr） 氨苄青霉素抗性基因是基因操作中使用最广泛的选择标记，绝大多数在大肠杆菌中克隆的质粒载体带有该基因。青霉素可抑制细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结合并抑制其活性，抑制转肽反应。氨苄青霉素抗性基因编码一个酶，该酶可分泌进入细菌的周质区，抑制转肽反应并催化 β-内酰胺环水解，从而解除了氨苄青霉素的毒性。
一个质粒携带有氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因
按照你的表述，EcoRI酶切位点是在卡那霉素抗性基因内部？
那么，如果这个抗性基因插入了你的目的基因，那么这个基因就被破坏，也就失去了卡那抗性。
所以，插入了目的基因的质粒，应该是只有氨苄抗性的。所以转化之后涂平板，不能用双抗，只能用氨苄抗性。
要鉴别是否插入目的基因，很简单：
1，菌落pcr：从转化平板上随机挑选几个菌落，用普通pcr体系，以菌体为模板，做pcr，然后跑胶鉴定。(我的经验，这一步阳性了就基本准了)
2，从菌落pcr阳性菌内提质粒酶切鉴定。（这个最准）
3，如果你实在是要求用抗性来筛（其实抗性筛选不是很准），你用两种平板，一种是amp平板（也就是转化用的平板），一种是amp+kan平板，你用接种环或者灭过菌的牙签，从amp转化平板上的菌落点一下，再在amp
+kan平板上原位点一下，培养。
如果同一个菌落，只能在amp上长，而不能在双抗上长，就可能是重组质粒。